更新時間:2022-08-21
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【產(chǎn)品名稱】:山羊丙酮檢測ELISA試劑盒價格
【英文名稱】:Goat acetone ELISA KIT
【經(jīng)營品牌】:RD、TSZ 提供免費待測服務!
【產(chǎn)品包裝】:96T/48T
【保存條件】:2-8℃
【注意事項】
1.正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
① 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
② 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
③ 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
④ 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
“山羊丙酮檢測ELISA試劑盒價格”實驗中的封閉
·ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用。
·封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
·加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
·蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理。
本底及假陽性產(chǎn)生的原因分析之基因工程抗原與合成肽抗原的區(qū)別:基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達的蛋白質(zhì)抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為表達系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比的話,特點有:分子量大。合成肽采用化學方法制備,由于工藝的局限,合成數(shù)量有限,只能達到數(shù)百個氨基酸;而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。
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2. 樣本稀釋液,我公司提供的樣本稀釋液可有效消除血清中某些成份的影響,準確度更高。