時(shí)間過的真快,本月就要結(jié)束了,回顧前面的新聞資訊中,我公司為大家?guī)淼闹饕獌?nèi)容有Elisa操作技術(shù)、培養(yǎng)基制備流程,還有一些合作成功案例。今天,我們一起來看看五月總結(jié)培養(yǎng)基應(yīng)用技術(shù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)原理:
培養(yǎng)基(culture medium)是根據(jù)微生物生長繁殖所需要的一定比例的營養(yǎng)物質(zhì)(碳源、氮源等)、氫離子濃度(pH值)以及滲透壓等條件,用人工方法制成的無菌營養(yǎng)基質(zhì)。主要用于微生物分離培養(yǎng)、生化鑒定和保存菌種等。培養(yǎng)基按物理性狀不同可分為固體、半固體和液體培養(yǎng)基;按性質(zhì)和用途不同又可細(xì)分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和特殊培養(yǎng)基。根據(jù)物理性狀和用途等不同常將培養(yǎng)基分裝于試管或平皿等容器中。常用培養(yǎng)基制備的一般程序是:調(diào)配成分溶解→較正pH值→過濾→分裝→滅菌→質(zhì)量檢驗(yàn)→保存。配制培養(yǎng)基時(shí)可以按照培養(yǎng)基配方調(diào)配各種基本成分,也可購買半成品的商品培養(yǎng)基干粉制劑直接配制。
應(yīng)用技術(shù):
1.培養(yǎng)基的脫氧:必要時(shí),將培養(yǎng)基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min;加熱時(shí)松開容器的蓋子;加熱后蓋緊,并迅速冷卻至使用溫度。
2.廠家已做過適用性檢查的,是否還需進(jìn)行適用性檢查?答:廠家的適用性檢查不能代表某個(gè)特定的實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)室在購入培養(yǎng)基后,應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的配制和滅菌方法進(jìn)行適用性檢查。
3.添加成分的加入:對熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)再加入。無菌的添加成分在加入前應(yīng)先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結(jié)或形成片狀物。將加入添加成分的培養(yǎng)基緩慢充分混勻,盡快分裝到待用的容器中。
4.培養(yǎng)基的有效期一般可以控制在多長時(shí)間?答:無菌檢查的培養(yǎng)基貯存期限可參見藥典規(guī)定。微生物限度檢查的培養(yǎng)基,應(yīng)對保存期進(jìn)行驗(yàn)證。
5.培養(yǎng)基適用性檢查中,五種菌液是否都要制備使用?答:計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查五種試驗(yàn)菌均應(yīng)使用。
6.如何準(zhǔn)確方便的控制培養(yǎng)基的PH值?答:在滅菌前測定和調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值。
7.培養(yǎng)基在滅菌后測其PH值,像營養(yǎng)瓊脂在冷卻到室溫25℃時(shí)已經(jīng)凝結(jié),該如何測定?答:在滅菌前測定何調(diào)節(jié)pH值。
保存方法:
制備好且標(biāo)記清楚的培養(yǎng)基置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫?/span>嚴(yán)格滅菌后的培養(yǎng)基一般可保存1周以上,但不宜過久。注意平板培養(yǎng)基應(yīng)底上蓋下倒置保存,以防止蓋內(nèi)水蒸汽落在培養(yǎng)基表面,使得培養(yǎng)基表面粘滯易污染且不易接種;液體、半固體等培養(yǎng)基應(yīng)直立保存。
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