實驗前的準備工作是非常重要的,操作者需要在實驗開始之前將所需材料準備齊全。在ELISA試劑盒操作中,像蒸餾水、加樣器、振蕩器、磁力攪拌器等材料需自備,今天上海恒遠來和您說說這其中*的九種試劑:
1. 稀釋液
2. ABTS使用液
3. 抗原、抗體和酶標記抗體
4. 正常人血清和陽性對照血清
5. 終止液(2M H2SO4)
6. 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸)
7. 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液)
8. 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
9. TMB(四甲基聯苯胺)使用液
上面說的九種試劑是試劑盒之外的,試劑盒內的洗滌緩沖液(50×)需要蒸餾水50倍稀釋,標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
0 pg/ml | 空白對照 | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
12.5 pg/ml | 1號標準品 | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
25 pg/ml | 2號標準品 | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
50 pg/ml | 3號標準品 | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
100 pg/ml | 4號標準品 | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
200 pg/ml | 5號標準品 | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
400 pg/ml | 6號標準品 | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
ELISA是一種免疫測定,應用免疫學技術測定標本的方法。可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行ELISA試劑盒操作測定,有些則需經預處理。