前言:時光匆匆而過,不久前我們常提到年末,今天便是本年度的zui后一日了。作為國內ELISA試劑盒批發商,上海恒遠帶您一起回顧2014年主要的*ELISA操作重點,希望在新一年的實驗中可以給您帶來幫助。
*、讓競爭ELISA方法起到*作用
ELISA試劑盒的英文名稱是ELISA KIT,它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。
可以利用競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被抗 氟喹諾酮抗原。檢測時,加入標準品或樣品溶液,氟喹諾酮抗體及酶標記物,包被抗原和加入樣本中的氟喹諾酮競爭性地與氟喹諾酮抗體結合后,再與酶標記物形成抗原抗體復合物,用TMB底物顯色;加入反應終止液,在450nm波長酶標儀下進行檢測,樣品中的氟喹諾酮濃度與吸收光強度成反比。
第二、冬季也要將ELISA實驗保溫做得棒棒噠
1. 為何要保溫?
因為ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。
2. 保溫的方式有哪些咧?
除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴:
① 可將ELISA試板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。
② 為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水面上。
③ 若用保溫箱,應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。
④ 濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。
⑤ 無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
⑥ 室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。
⑦ 室溫溫育時,只要平置于操作臺上即可。
⑧ 應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。
⑨ 為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
第三、實驗中的回溫平衡
在加樣之前約半小時左右,把試劑盒從冰箱中取出,放置在室溫下進行平衡,平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進行快速回溫。
以上就是今天的全部內容了,在未來的時光里,我們期待可以與您共同完成ELISA實驗,歡迎關注上海恒遠ELISA試劑盒批發商,我們明年再見!