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植物體內(nèi)游離脯氨酸含量實(shí)驗(yàn)原理

更新時(shí)間:2013-03-27   點(diǎn)擊次數(shù):2060次

實(shí)驗(yàn)原理

 植物在正常條件下,游離脯氨酸含量很低,但遇到干旱、低溫、鹽堿等逆境時(shí),游離脯氨酸便會(huì)大量積累,并且積累指數(shù)與植物的抗逆性有關(guān)。因此,脯氨酸可作為植物抗逆性的一項(xiàng)生化指標(biāo)。

脯氨酸是水溶性zui大的氨基酸,具有很強(qiáng)的水合能力,其水溶液具有很高的水勢(shì)。脯氨酸的 疏水端可和蛋白質(zhì)結(jié)合,親水端可與水分子結(jié)合,蛋白質(zhì)可借助脯氨酸束縛更多的水,從而防止 滲透脅迫條件下蛋白質(zhì)的脫水變性。 因此脯氨酸在植物的滲透調(diào)節(jié)中起重要作用, 而且即使在含 水量很低的細(xì)胞內(nèi),脯氨酸溶液仍能提供足夠的自由水,以維持正常的生命活動(dòng)。正常情況下, 植物體內(nèi)脯氨酸含量并不高,但遭受水分、鹽分等脅迫時(shí)體內(nèi)的脯氨酸含量往往增加,它在一定 程度上反映植物受環(huán)境水分和鹽度脅迫的情況,以及植物對(duì)水分和鹽分脅迫的忍耐及抵抗能力。

采用磺基水楊酸提取植物體內(nèi)的游離脯氨酸,不僅大大減小了其他氨基酸的干擾,快速簡(jiǎn)便,而且不受樣品狀態(tài)(干或鮮樣)限制。在酸性條件下,脯氨酸與茚三酮反應(yīng)穩(wěn)定的紅色縮合物,用甲苯萃取后,此縮合物在波長(zhǎng)520nm處有一zui大吸收峰。脯氨酸濃度的高低在一定范圍內(nèi)與其消光度成正比。

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