染色過強原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時間過長 降低抗體滴度、抗體孵育時間:室溫1小時或4度過夜
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28
c DAB顯色時間過長或濃度過高 顯色時間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準
2、非特異性背景染色
原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步沖洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長
c 組織中含內原性生物素 正常非免疫動物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時間
3、染色弱
原因 解決方法
a 抗體濃度過低、孵育時間過短 提高抗體濃度、孵育時間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時間 應更換試劑
c 操作中添加試劑時緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液 使試劑稀釋 (應防止切片干燥)
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘
4、染色陰性
原因 解決方法
a 操作步驟錯誤 應重試 設陽性對照
b 組織中無抗原 設陽性對照以驗證試驗結果
c 一抗與二抗種屬連接錯誤 仔細確定一抗二抗種屬無誤
上海恒遠ELISA試劑盒供應商是大的科研試劑供應商,不管在質量控制體系還是服務方面都占有的優勢,我公司主營產品:人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,微生物培養基,進口抗體,我公司試劑盒產品免費代測,送貨上門。我公司是一家技術服務型渠道企業,在行業發展中所承擔的角色是一種溝通產出方和需求方(科研和市場)的媒介,我們致力為行業人才提供了包括科研在內的更多出口,為科研提供了有力的硬件支持,有效地促進科研和市場需求結合,提高了科研成果的轉化效率,使得科研更具活力。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高品質的產品和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是*zui的服務!