一、血清的保存問題。
1、問:2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月還能用嗎?
答:只有試試了,如果一直在-20℃凍著來者,應該還可以,先少用點看看。養細胞系應該沒問題,原代不行。
2、問:請問我自然溶化好的胎牛血清和1640培養基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室溫下一晚行嗎?100毫升培養瓶加多少培養基呢?
答:可以放4℃。4-5ml。
3、問:4℃冰箱內保存3個月的胎牛血清,能否繼續使用?相關細胞和其它試劑的代價比較高,不敢輕易嘗試。
答:需要長期保存的胎牛血清必須要保存在-20至-70℃的低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間不要超過1個月。
二、血清滅活時溫度問題。
1、問:因為實驗室水浴鍋失控,血清滅活時,溫度到了61.7℃,這血清還能用嗎?
答:多長時間啊?短時間應該可以吧,我有一次加熱了一個多小時,還照樣用。
2、問:我滅活胎牛血清時,用的電磁爐,定在了70℃,本來說調溫度到56℃再放血清的,后來忘了,就把血清放進去了,所以滅活的溫度肯定超過56℃了,不知道這樣對血清有沒有影響?
答:常規滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時間則從15分鐘到60分鐘不等,其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。看看你養的細胞是什么,一般的話估計問題不大,要是很珍貴的細胞還是慎重一點啊。熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質, 在對補體滅活以外,熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用。現在好像不主張熱滅活,熱滅活經常給血清產品帶來負面影響,對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生,此外,有研究結果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用。