如果您了解操作步驟,那么就能夠制備優質培養基。今天我們一起來看制備優質培養基的八大步驟。
1.稱量:根據用量按比例依次稱取成分,牛肉膏常用玻棒挑取,放在小燒杯或表面皿中稱量,用熱水溶化后倒入燒杯,蛋白胨易吸濕,稱量時要迅速。
2.溶解:在燒杯中加入少于所需要的水量,加熱,ZHU一加入各成分,使其溶解,瓊脂在溶液煮沸后加入,融化過程需不斷攪拌。加熱時應注意火力,勿使培養基燒焦或溢出。溶好后,補足所需水分。
3.調PH:用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH調至所需范圍。
4.過濾:趁熱用濾紙或多層紗布過濾,以利于某些實驗結果的觀察,如無特殊要求時可省去此步驟。
5.分裝:按實驗要求,可將配制的培養基分裝入試管內或三解瓶內;分裝時注意,勿使培養基沾染在容器口上,以免沾染棉塞引起污染。
① 液體分裝:分裝高度以試管高度的1/4左右為宜,分裝三角瓶的量則根據需要而定,一般以不超過三角瓶容積的1/2為宜。
② 固體分裝:分裝試管,其裝量不超過管高的1/5,滅菌后制成斜面,斜面長度不超過管長的1/2。分裝三解瓶,以不超過容積的1/2為宜。
③ 半固體分裝:裝置以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
6.加棉塞:分裝完畢后,在試管口或三解瓶口塞上棉塞或泡沫塑料塞及試管帽等,以阻止外界微生物進入培養基而造成污染,并保證有良好的通氣性能。
7.包扎:棉塞頭上包一層牛皮紙,扎緊,即可進行滅菌。
8.保存:滅菌后的培養基放入37℃養箱中培養24小時,以檢驗滅菌的效果,無污染方可使用。
制備目的:學習制備培養基的基本技術。
所需試劑:牛肉膏,蛋白胨、NaCl、瓊脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。
其它材料:試管,三角燒瓶,燒杯,量筒,漏斗,乳膠管,彈簧夾,紗布,棉花,牛皮紙,線繩,pH試紙,電爐,臺稱。
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